如今,食品安全問題是社會熱點和焦點,影響動物性食品安全的直接主要因素是飼料安全。
目前,飼料及食品中致病微生物快速檢測方法應用較多的主要有:酶聯免疫吸附法、PCR 技術、基因芯片(DNA Chip)鑒定技術等。
上一次我們介紹到,由農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所“飼料質量安全檢測與評價"創新團隊創建的一大技術平臺【基因膜芯片】中的一大“功臣"——MFS-24基因膜芯片檢測系統。
現已將實驗流程及數據總結完成,發布為文獻。
本篇我們將著重分享基因膜芯片在檢測飼料中6種致病微生物的驗證結果。
一、實驗流程
使用MFS-24進行對23份飼料樣品與6種標準菌株進行快速檢測
l 樣品處理與前增菌培養
l 樣品DNA提取
l 多重PCR擴增
l 膜芯片雜交
膜芯片雜交反應程序
二、實驗結果
分別對 0.01 ~ 1 ng/mL 的標準菌株 DNA 樣本進行測定,方法檢出限為 0.01 ng/μL。(圖1)
為進一步確定在檢測該臨界濃度核酸時體系穩定性, 重復利用膜芯片對0.01 ng/μL 的 DNA 樣本進行測試,結果表明,多重 PCR-膜芯片方法的檢測限均能達到 0.01 ng/μL(圖 2)。
圖1.不同致病菌濃度梯度檢測結果
圖2.膜芯片的檢出限
通過模擬增菌實驗以及與現行標準檢測方法結果對比, 表明該方法具有良好重復性、 再現性和特異性,綜合檢出限為培養前 1 ~ 5 CFU/mL(核酸樣本為 0.01 ng/μL)。
基于多重 PCR-膜芯片技術可實現在 24 h 內對飼料及原料樣品中 6 種致病微生物進行高通量、快速篩查,為保障飼料及食品安全提供了一種快速有效的檢測新手段。
三、總結
通過模擬增菌實驗以及與現行標準檢測方法結果對比, 表明該方法具有良好重復性、 再現性和特異性,綜合檢出限為培養前 1 ~ 5 CFU/mL(核酸樣本為 0.01 ng/μL)。
多重 PCR膜芯片技術可實現在24小時內對飼料及原料樣品中 6 種致病微生物進行高通量、快速篩查,為保障飼料及食品安全提供了一種快速有效的檢測新手段!
MFS-24基因膜芯片檢測系統
MFS-24基因膜芯片檢測系統是一款集成式的核酸檢測設備,它創新性地將核酸雜交、酶標、清洗、顯色、結果掃描等標準環節集成于一臺機器內。
用戶只需按要求加載樣本、試劑和芯片耗材,一鍵啟動,即可得到檢測結果,實現了從進樣到出結果的整個過程的全自動化。
設備應用領域廣泛,可同時滿足呼吸道病毒、腸道疾病、宮內感染、動物源性成份、微生物、農作物轉基因等多領域、多靶標的檢測與科研應用,在同類產品中處于重要地位。
1、本文數據由中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所、湖北省獸藥監察所/湖北省畜禽產品質量監督檢驗測試中心、四川華漢三創生物科技有限公司撰寫文獻【多重 PCR-膜芯片技術快速檢測飼料中6 種致病微生物】提供。
2、四川華漢三創生物科技作為普敦科技的兄弟公司攜手并肩,互相支持,共同發展。普敦科技全權負責MFS-24基因膜芯片檢測系統的市場與銷售。
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